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1、开始运行仪器
打开荧光定量PCR仪底座开关,再打开定量PCR仪检测器开关。实验前先让系统预热30分钟,打开电脑,启动iQ5软件。
2、放置样品
将PCR反应体系加入到0.2ml的薄壁管或96孔板中,盖上管盖。注意,必须带一次性塑料手套,不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。
3、设置程序,运行实验定量PCR软件操作基本步骤为:
a.设置热循环程序文件(Protocolfile)
b.设置反应板文件(PlateSetupfile)
c.点击“Run”键,运行程序
d.数据分析
4、荧光定量PCR仪测量结果分析
①PCR反应结束后,软件会自动计算标准曲线和Ct值等。
②如需进行表达量分析、等位基因分析等,在软件窗口选择相应分析功能。
③点击右上方的“Report”键,还可输出结果报告单
5、关闭运行仪器
实验结束后关闭iQ5软件、荧光定量检测器及扩增系统电源,关闭电脑,取出反应管。
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