三维细胞培养系统如今很好的应用在科研实验中，今天就来介绍细胞培养的一些常见问题解答：
1.冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后须立即放入37℃水浴箱中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。
2.可否使用与原先培养条件不同之培养基？
不能；每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。
3.悬浮性细胞应如何继代处理？
一般仅需持续加入新鲜培养基于原
三维细胞培养系统角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。
6.欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？
欲回收动物细胞，其离心速率一般为1,000rpm)，5-10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡。
7.细胞之接种密度为何？
依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因。
8.冷冻保存细胞之方法？
方法一：冷冻管置于4℃30~60分钟→(-20°C30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80℃以下，再放入液氮槽长期储存。
-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
9.购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？
研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：
培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于80℃太久。
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