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BD流式细胞仪的阳性判断简介

更新时间:2017-06-28浏览:3173次

  使用BD流式细胞仪分析的主要目的在于区分细胞对于检测指标是阳性还是阴性,或计算阳性细胞与阴性细胞的比例。这就需要准确的仪器设置及良好的实验重复性,分析时运用恰当对照及分析方法。各种不同的流式细胞仪实验需要不同的阴性对照,因而也是一些争论及讨论的焦点。

  在BD流式细胞仪实验中为基础的问题是哪些染色的细胞是阳性或阴性,或对于某一标志物阳性细胞或阴性细胞的比例是多少。要回答这个问题需要仔细调节仪器并使用对照品。

  首先,探测器的增益需调节准确从而获得佳的灵敏度,荧光补偿必须设置正确,从而避免出现虚假或不必要的错误结果。

  第二,对于没有明显双峰分布(阳性峰)的样本,需要做设门对照。在某些情况下,生物比较样本(如未刺激的细胞)可提供佳的设门对照来决定细胞阳性范围。在某些不可能获得生物比较样本的情况下,可使用同型对照或FMO对照。以上这些并不是所有的选择,选择何种方式取决于是荧光渗漏或抗体非特异性结合对实验的影响大小。初,可通过检测多种对照来决定哪一个更适合于定义阳性、阴性界线。在任何实验中都须避免因为没有充分考虑而使用不恰当的对照品。坚持使用经实验证明的设门方法将有助于标准化BD流式细胞仪分析项目来解答重要的临床问题。

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