分析pcr仪扩增产物电泳分析时没有条带

   产生pcr仪扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅的原因有以下几种：

1、反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系，这是常见的原因；

2、与反应起始时RNA的总量及纯度有关：建议在试验中加入对照RNA；

3、*链的反应产物在进行PCR扩增时，在总的反应体系中的含量不要超过1/10：建议用Oligo（dT）或随机引物代替基因特异性引物（GSP）用于*链合成。

4、由于RNA模板存在二级结构，如环状结果，有可能导致GSP无法与模板退火；或SSⅡ反转录酶无法从此引物进行有效延伸。

5、目的mRNA中含有强的转录中止位点，可以试用以下方法解决：

①将*链的反应温度提高至50℃。

②使用随机六聚体代替Oligo（dT）进行*链反应。