多功能酶标仪是实验室常用的微量检测设备，可实现酶联免疫吸附试验(ELISA)、核酸定量、蛋白浓度测定、细胞活力检测等多种功能，广泛应用于生物、医药、食品检测等领域。其核心工作逻辑基于光的吸收、荧光、化学发光等光学检测原理，结合自动化控制系统完成批量样品分析。
一、 核心检测原理分类
多功能酶标仪的 “多功能”，本质是集成了多种光学检测模块，不同模块对应不同的检测原理：
光吸收法(比色法)
这是酶标仪最基础的功能，核心依据朗伯 - 比尔定律—— 当一束单色光通过均匀的溶液时，溶液对光的吸光度与溶液浓度、液层厚度成正比。
工作过程：光源发出复合光，经单色器过滤后得到特定波长的单色光，穿透微孔板中的样品溶液；检测器接收透过的光信号，将其转换为电信号；系统根据吸光度数值计算样品中目标物质的浓度。
典型应用：ELISA 检测、蛋白定量(如 BCA 法、Lowry 法)、核酸纯度与浓度测定。
荧光法
针对低浓度物质的高灵敏度检测，原理是利用荧光物质的激发 - 发射特性。
工作过程：特定波长的激发光照射样品，样品中的荧光物质吸收能量后跃迁到激发态；当物质回到基态时，会释放出波长更长的发射光；荧光检测器捕捉发射光信号，信号强度与荧光物质浓度正相关。
关键设计：激发光与发射光通过滤光片组分离，避免激发光干扰检测结果，保证数据准确性。
典型应用：荧光定量 PCR 产物检测、细胞内活性氧检测、荧光免疫分析。
化学发光法
基于化学反应释放的光子进行检测，灵敏度比荧光法更高，无需外部光源。
工作过程：样品中的目标物质参与化学发光反应(如酶促发光、直接发光)，反应过程中释放出光子；光子被高灵敏度的光电倍增管(PMT)捕捉，转化为电信号后进行定量分析。
典型应用：化学发光免疫分析、基因检测、药物筛选。
二、 设备核心结构与工作流程
(一) 核心结构组成
光学系统：包含光源(卤素灯、氙灯、LED 灯等)、单色器 / 滤光片组、光路传输组件、检测器(光电二极管、光电倍增管)，是检测信号的核心生成与采集部件。
样品处理系统：主要为微孔板载台，支持 96 孔、384 孔等标准微孔板，配备自动进样、定位校准功能，确保每个样品孔精准对位光路。
控制系统：由嵌入式芯片与操作软件组成，负责设定检测参数(波长、检测模式、读数时间等)、控制设备运行、处理与输出检测数据。
(二) 基础工作流程
样品准备：将配制好的样品加入微孔板，完成孵育、洗涤、显色(或荧光标记)等前处理步骤。
参数设置：在酶标仪操作软件中选择检测模式(光吸收 / 荧光 / 化学发光)、设定检测波长、选择微孔板类型与读数方式(单波长 / 双波长)。
自动检测：将微孔板放入载台，设备自动完成孔位定位，逐孔进行光学信号检测与数据采集。
数据输出：系统自动处理原始数据，生成吸光度 / 荧光强度 / 发光强度报告，支持数据导出与进一步分析。
三、 原理应用的注意事项
波长选择：不同检测方法需匹配对应波长，如光吸收法测蛋白常用 280nm，ELISA 检测常用 450nm；荧光法需同时设置激发波长与发射波长。
微孔板选择：不同检测模式适配不同材质微孔板，荧光检测需使用黑色微孔板减少光干扰，化学发光检测需避免使用透光性差的板型。
背景干扰消除：检测前需设置空白对照孔，系统会自动扣除空白背景信号，提升数据准确性；双波长检测可有效消除样品浑浊、微孔板划痕等带来的干扰。
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