NanoDrop One 超微量分光光度计是实验室快速检测核酸、蛋白等样品浓度与纯度的核心设备,其检测精度高、样品用量少,做好样品检测的细节把控,能有效避免数据偏差、保障检测结果可靠,以下是关键注意事项:
样品预处理与用量把控
检测前需确保样品无杂质、无气泡,若样品中存在颗粒物、纤维等杂质,需先通过离心(12000rpm,5-10min)或 0.22μm 滤膜过滤处理,防止杂质附着检测探头影响吸光度读数;同时要避免样品中混入气泡,否则会造成数据波动或无效读数。该设备仅需 0.5-2μL 样品即可检测,取样时需用移液枪精准控制体积,不可过量(过量易溢出污染探头),也不可不足(不足无法形成完整液柱,导致检测失败);且移液枪枪头需无残留、无污染,建议一次性使用,防止交叉污染。
检测探头清洁与维护
检测探头的洁净度直接决定数据准确性,每次检测前后需用去离子水或适配的溶剂(如检测蛋白用缓冲液、检测有机溶剂样品用无水乙醇)擦拭探头表面,去除残留样品;若样品黏性较大(如含高浓度甘油的样品),需用无尘棉签蘸取对应溶剂轻轻擦拭,再用去离子水清洁,最后用无尘纸吸干水分,严禁刮擦探头光学表面。若探头出现顽固污渍,可使用设备专用清洁液处理,不可用强酸强碱或粗糙工具清洁,避免损伤光学元件。
检测环境与参数设置
设备需放置在稳定、无强光直射的环境中,检测时环境温度需控制在 15-30℃,避免温度剧烈波动影响检测精度;同时要保持设备水平放置,防止样品液柱因设备倾斜出现形态异常。检测前需根据样品类型正确设置参数,比如检测 dsDNA 选择 A260/A280 模式、检测蛋白选择 A280 模式,还要确认基线校准完成,若基线波动超出允许范围,需重新校准后再进行检测;对于特殊样品(如低浓度核酸、带荧光标记的样品),需选择对应检测程序,不可用通用模式强行检测。
样品回收与后续清理
若样品需回收,需在检测完成后立即用洁净移液枪将样品从探头处吸回至原管,操作时要避免接触探头造成二次污染,且回收的样品需做好标识,不可与未检测样品混淆。无需回收的样品,需用去离子水彻底清洁探头和周边台面,防止样品残留滋生细菌或腐蚀设备;检测结束后,需关闭设备检测舱盖,定期清理设备外壳灰尘,同时做好检测数据的备份与记录,便于后续实验追溯。