BD Accuri C6 Plus流式细胞仪是一种可以快速检测细胞体积、数量、周期和表型的分析技术。使用激光作为发光源,经过聚焦整形后的光束垂直照射在样品流上。这使得细胞或微粒上的荧光染料被激发,产生散射光和激发荧光。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小。前向散射光(FSC)的强弱与细胞的大小相关,而侧向散射光(SSC)的强弱则与细胞内的颗粒多少相关。
荧光信号的接收方向与激光束垂直。经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。这些信号用于检测细胞上的特定标记物,如表面蛋白或DNA含量;主要由流动室和液流系统、光源与光学系统、信号收集与信号转换系统以及计算机与分析系统四部分组成。具有分选功能的流式细胞仪还包括分选机制;收集到的信号由计算机系统进行分析,可以定量检测单个细胞的多项指标,从而提供关于细胞群体特性的详细信息。
BD Accuri C6 Plus流式细胞仪的启动流程:
1、检查所有瓶中的液面高度。
2、轻轻推开样品支架,在上样针处放上一根装有至少2ml过滤去离子水的管子。
注意:样品支架可以安放多种管子,包括任何品牌的12x75mm的管子,以及大多数离心管(不盖盖子)。
3、把样品管上到适当的位置,拉出样品支架来支撑管子,支架会自动锁在合适的位置。
注意:样品管在上样针顶端并不形成密封。当将上样针插进样品管时,注意不要使上样针弯曲或者顶在管子外侧。
4、用力按BD C6流式细胞仪前方的电源键,启动C6,在启动期间,CFlow软件的黄色灯会亮,同时C6的泵会开始运行。当打开电源时,C6会自动用鞘液冲洗液流管线。这一启动过程持续大约5分钟。
注意:当C6启动时,不要打开仪器的盖子,因为打开盖子会干扰激光预热的过程,并延长启动时间。
5、当CFlow软件的灯变绿,显示CFlow已经连接并准备完毕(CFlowareconnectedandready),上过滤去离子水运行至少15分钟,然后再进行样本检测。
6、对BD C6流式细胞仪进行质控检测,请参阅CFlow用户指南(CFlowUser’sGuide)了解使用C6提供的质控小球进行质控检测操作的细节。
BD Accuri C6 Plus流式细胞仪的关闭操作:
1、在上样针处放上装有2ml过滤去离子水的管子,此时先不要在CFlow软件中选择任何空的样品孔。
2、设定时间2分钟。
3、点击RUN按键。
4、在上样针处放上装有2ml去污液(Decontamination Solution,AccuriPart#KR-200)的管子。
5、选择一个空的样品孔。
6、设定时间2分钟,设定流速为高速。
7、点击RUN按键。
8、当运行结束,从上样针移去清洗液管子。
9、放上装有2ml过滤去离子水的管子,此时不要选择任何空的样品孔。
10、设定时间2分钟。
11、点击RUN按键。
12、当运行结束,将管子留在上样针处。
13、按电源键,清洗液流循环会自动运行大约13分钟,然后C6会自动关机。
14、在C6关机的过程中,仪器会自动运行液流循环,先后使用去污液和鞘液清洗管路和上样针。
注意:不是必须在关闭流式细胞仪前退出CFlow软件或关闭计算机。