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二维贴壁:细胞摊平在硬质培养底面,细胞骨架被迫重塑,干性基因下调,很容易提前自发分化,就算不停换因子也很难稳住干性。微重力三维:低剪切力悬浮环境,干细胞自发组装成三维球体,重建细胞间紧密连接,干性标志物表达更高,不容易意外分化,干性状态更稳定。
二维:平面培养力学信号异常,分化不可控、分化不均,批次差异大,同方案不同瓶结果差别明显。微重力三维:模拟体内力学微环境,细胞自组织有序,分化方向更容易调控,有效降低批次间差异,实验重复性更好。
二维是平面单层,只有上下两面接触培养基,缺少体内三维细胞间通讯,基因表达谱和体内差距大。微重力三维:无支架自组装成球,细胞相互接触、信号交流充分,基因表达、细胞分泌因子更接近体内真实生理状态,适合类器官、组织工程、药物筛选模型。
普通悬浮搅拌培养容易产生高剪切力,损伤干细胞;微重力旋转体系,低剪切悬浮,减少细胞损伤,细胞活率更高,对间充质干细胞、神经干细胞这类对剪切敏感的细胞特别友好。
二维贴壁受培养底面积限制,扩培需要大量培养瓶、人工传代多,人为引入误差。微重力三维生物反应器,单位体积细胞载量更高,更容易从实验室小试放大,减少手工操作带来的批次波动。
传统二维贴壁,细胞扁平生长,干性掉得快、分化乱、批次不稳;微重力三维模拟体内低力学环境,干细胞自组装成球,干性维持更好、分化可控、生理相关性更强、批次重复性更高,解决很多干细胞实验老大难问题。
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