定量PCR仪的循环参数修改方法删除:按住Shift键并在相应的Stage或Step中点击,使该步骤被选中变黑,再按Del键即可删除。
插入:在需要插入参数的位置点击,出现粗黑竖线后,分别点击Add Hold、Add Cycle或Add Step按钮添加保温、循环或循环中的一个步骤。
修改温度和时间:拖动鼠标,选中需要修改的温度或时间数字,输入新的数值即可。
其他设置反应体积:定量PCR仪的标准反应体积是50µL;如果想修改的话,建议大于25µL。
融解曲线试验:在Dissociation Protocol选项左边的方框中打钩,仪器即在定量PCR仪循环完成后继续做融解曲线试验。
启动扩增点Save按钮保存文件设置。确认96孔板或全部样品管在主机内放置妥当后,点击Start按钮,开始PCR循环。屏幕上动态显示PCR进程和剩余时间。
监控进程切换到Results页面的Amp Plot子页面,可以实时显示PCR曲线随着循环增加而逐步增长的实际情况。如果Detector选FAM或VIC,只显示对应探针的变化情况;如果选All,则同时显示所有探针的反应进程。
保存结果程序结束后,点Disconnect按钮,然后File→Save保存实验结果。可以保存为.sds格式,也可以保存为.sdt格式,作为以后同类实验的模板,节省软件设置时间。